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高效液相色谱法测定发酵食品中组胺的含量

2020-08-26

   生物胺是一类具有生物活性含氮的低分子量有机化合物的总称。可以看作是氨分子中1-3个氢原子被烷基或芳基取代后而生成的物质,是脂肪族、酯环族或杂环族的低分子量有机碱,常存在于动植物体内及食品中。生物胺引起的食品安全问题,也就是生物胺的毒性作用。其中组胺对人类健康的影响*大,其次是酪胺。除了组胺、酪胺本身的作用外,其他生物胺的存在会增强组胺和酪胺的不良作用。

   高效液相色谱具有分析速度快、柱效高、检测灵敏度高、定量分析准确的特点,是目前食品中生物胺含量分析测定的主要手段。生物胺分子中缺少发色基团,本身既无紫外吸收、又无荧光及电化学活性。为了提高检测的灵敏度及其响应,必须衍生后才能检测。

   本文以丹酰氯为衍生试剂,采用柱前衍生--高效液相色谱法来分析食品中组胺的含量,通过对市售不同品牌的大豆发酵制品(豆豉、豆酱和酱油)、酸奶和啤酒中组胺含量的测定,对各种食品的组胺含量有一个初步的了解,为保障食品安全提供技术依据。

 仪器准备

 

 

仪器简介

    LC-600A智能全控液相色谱系统由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等,实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。

 

应用领域

化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析

 

柱前衍生

取样品提取液0.25mL,加入25μL2mol/L的氢氧化钠调节pH值,加入75μL饱和碳酸氢钠溶液和0.5mL10mg/mL丹酰氯-丙酮溶液,摇匀,于40℃水浴下避光反应45min;反应毕,取出加入25μL25%的浓氨水,静置30min,用乙腈定容至1.25mL,振荡混匀。将衍生后溶液用0.45μm针头微孔滤膜过滤器过滤,用高效液相色谱测定。

 

 

谱条件:

 

色谱柱

Hypersil-C18色谱柱(250×4.6mm I.D .粒径5μm

柱温

室温

流动相

V(乙腈):V(水)=60:40

流速

1.0mL/min

紫外检测波长

254nm

进样量

20μL

采样时间

30min

 

 

谱图

 

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南京科捷分析仪器有限公司主要供应气相色谱仪,高效液相色谱仪,原子吸收光谱仪,原子荧光光谱仪,紫外可见分光光度计等多种分析仪器及配套产品

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