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光化学衍生-高效液相色谱法检测食品中的黄曲霉**

2020-09-11

   黄曲霉**是由黄曲霉和寄生曲霉次级代谢产生的一组化学结构类似的化合物,对人类和家畜的健康有很大的危害性。植物来源的样品中通常易污染AFB1、AFB2、AFG1、AFG2,它们具有ji强的急性毒性,是目前已知毒性zui强的化合物之一,并有确切的三致作用,其中AFB1毒性zui强。GB2761-2011规定在一般粮谷类制品中AFB1的限量为5-20μg/kg,欧盟规定AFB1在食品中的残留限量为2μg/kg,黄曲霉***总量(AFB1+AFB2+AFG1+AFG2)小于4μg/kg。高效液相色谱法荧光检测是黄曲霉**分析的主要手段,为了提高检测灵敏度需要进行衍生化,常用的衍生化方法有柱前三氟乙酸衍生,柱后溴衍生法,柱后碘衍生化等,这些衍生化方法操作繁琐,重现性受人为因素影响很大,且需要使用刺激性强的试剂,对检测人员的技术要求较高。国际分析化学家协会标准AOAC Offical Method 2005.08采用柱后光化学衍生-液相色谱法检测黄曲霉**,在 样品净化过程中使用免疫亲和柱。本研究采用聚乙多重吸附原理的多功能柱对提取液进行净化,高效液相色谱分离-柱后光化学衍生-荧光检测,进一步降低了检测成本,具有操作简单、灵敏度高、环保等特点,适用于食品中黄曲霉**的日常检测。

 仪器准备

 

仪器简介

    LC-600A智能全控液相色谱系统由P600高压恒流泵与UV600紫外检测器直接构成等度分析系统。使用WS600工作站可以同时控制数台P600高压恒流泵、UV600紫外检测器及恒温柱箱等,实行多元高压洗脱、波长扫描等功能。

 

应用领域

化合物检测、法医毒物分析、蛋白质组学食品检测、药物分析、环境分析、聚合物分析

 

样品前处理:

准确称取混匀且彻底粉碎的样品25.00g于250ml锥形瓶中,加入100ml乙腈-水(84:16),高速均质2min,浸泡30min,超声提取30min,10000rpm离心5min,收集上清液。取8ml上清液至多功能净化柱的玻璃管中,将净化柱缓缓推入玻璃管底部,吸取4.0ml净化柱上部净化液,在50℃水浴中氮气吹干,加入1.0ml流动相溶解,涡旋混匀30s,经0.22μm滤膜过滤,制备成待测样液。

 

谱条件:

 

色谱柱

XSE-LECT HSS T3(4.6×150mm,5μm)

流动相

甲醇/水=38/62等度洗脱

流速

1.0mL/min

荧光检测器

激发波长360nm,发射波长440nm

柱温

40℃

进样量

20μL

谱图分析

 

 

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